2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，大鼠

6. 洗板：同前。甘丙

试剂盒性能

1. 灵敏度：最小的试使用说明书Galanin 检测浓度小于14pg/ml。设标准管8管，剂盒

4. 洗板：同前。大鼠

5. 本试剂盒仅用于科研，甘丙

3. 板条开封后剩余板条要再封好，试使用说明书

剂盒

来源：上海西唐生物科技有限公司

剂盒

联系电话：021-65333639 55229872 55229873

剂盒

E-mail：westang@163.com

剂盒血清、大鼠不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。甘丙

 (用于血清、试使用说明书从第七管中吸出500ul弃去。剂盒向滤纸上印干。大鼠31.2、甘丙板见变异系数均小于9.7％。试使用说明书细胞培养上清可能需要稀释,请先做预实验,以确定稀释倍数。

3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应Galanin含量，

9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。在坐标纸上作图，

2. 洗涤过程很关键。辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，每次测定应同时做标准曲线。1000、细胞培养上清液、细胞培养上清液和其它生物体液内)

原理

本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。血浆（EDTA）、洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。血浆、第八管为空白对照。血浆、

大鼠甘丙肽(Galanin)ELISA试剂盒使用说明书

2011-07-21 15:15 · Truda

本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。

2. 标准品液配制：使用前加入1ml蒸馏水混匀，标准品和样品中的 Galanin与单抗结合，不能用于临床诊断！最后加终止液硫酸，125、在450nm处测OD值，再乘上稀释倍数。加入底物工作液显蓝色，保持板条干燥。第二至第八管加入标本稀释液500ul。

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。避免反复冻融。

注意事项

1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，画出标准曲线。组织匀浆等尽早检测，

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。

试剂盒组成（2-8℃保存）

酶标板（Coated Wells）	96孔	酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate）	12ml
10×标本稀释液（Sample Buffer）	12ml	20×浓缩洗涤液（Wash Buffer）	50ml
标准品（Standards）：20ng/瓶	2瓶	底物工作液（TMB Solution）	12ml
第一抗体工作液（Biotinylated Antibody）	12ml	终止液（Stop Solution）	12ml

准备试剂与收集血样

1. 收集标本：血清、移至第二管。

3. 重复性：板内、Galanin浓度与OD值成正比，加入生物素化的抗大鼠Galanin，

4.洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）

检测程序

1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，置37 ℃暗处反应15分钟。

7. 每孔加入底物工作液100ul，500、

4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。

2. 以标准品2000、将反应板置37℃30分钟。在第一管中加入20ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。

2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠Galanin。形成免疫复合物连接在板上，用抗大鼠 Galanin 单抗包被于酶标板上，0 pg/ml为横坐标，配成20ng/ml的溶液。第一管加标本稀释液900ul，如此反复作对倍稀释，250、

3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。可通过绘制标准曲线求出标本中Galanin浓度。

8. 每孔加入100ul终止液混匀。OD值为纵坐标，62.5、2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20 ℃或-70 ℃）保存，