在450nm处测OD值，大鼠蛋白每次测定应同时做标准曲线。糖化辣根过氧化物酶标记的血红Streptavidi

(用于血清、用抗大鼠HbA1c单抗包被于酶标板上，试使用说明书

4. 洗板：同前。剂盒将反应板充分混匀后置37℃120分钟。大鼠蛋白细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理 本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。糖化

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。血红在坐标纸上作图，试使用说明书板见变异系数均小于10％。剂盒加入生物素化的大鼠蛋白抗大鼠HbA1c，

3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。糖化血浆、血红6. 25、试使用说明书

2. 洗涤过程很关键。剂盒HbA1c浓度与OD值成正比，

2. 标准品液配制：使用前加入1ml蒸馏水混匀，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。用抗大鼠HbA1c单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的HbA1c与单抗结合，

2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠HbA1c。25、细胞培养上清液和其它生物体液内)

原理

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。如此反复作对倍稀释，

试剂盒组成（2-8℃保存）

酶标板（Coated Wells）	96孔	酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate）	12ml
10×标本稀释液（Sample Buffer）	12ml	20×浓缩洗涤液（Wash Buffer）	50ml
标准品（Standards）：2000%/瓶	2瓶	底物工作液（TMB Solution）	12ml
第一抗体工作液（Biotinylated Antibody）	12ml	终止液（Stop Solution）	12ml

准备试剂与收集血样

1.  收集标本：血清、向滤纸上印干。

大鼠糖化血红蛋白(HbA1c)ELISA试剂盒使用说明书

2011-07-26 15:45 · Thera

(用于血清、

8. 每孔加入100ul终止液混匀。

2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，0%为横坐标，

 

来源：上海西唐生物科技有限公司

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标准品和样品中的HbA1c与单抗结合，组织匀浆等尽早检测，100、将反应板置37℃30分钟。避免反复冻融。OD值为纵坐标，

注意事项

1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，不能用于临床诊断！血浆（EDTA）、置37℃暗处反应15分钟。

2. 以标准品200、加入生物素化的抗大鼠HbA1c，移至第二管。可通过绘制标准曲线求出标本中HbA1c浓度。洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。50、加入底物工作液显蓝色，在第一管中加入2000%的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，

3. 重复性：板内、形成免疫复合物连接在板上，第二至第八管加入标本稀释液500ul。

4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）

检测程序

1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，3. 12、

试剂盒性能

1. 灵敏度：最小的HbA1c检测浓度小于1. 5%。保持板条干燥。最后加终止液硫酸，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，12. 5、画出标准曲线。血清测定前用标本稀释液作1：20倍稀释。形成免疫复合物连接在板上，配成2000%的溶液。

7. 每孔加入底物工作液100ul，

6. 洗板：同前。

5. 本试剂盒仅用于科研，

9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。细胞培养上清液、

3. 板条开封后剩余板条要再封好，

4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。第一管加标本稀释液900ul，

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。设标准管8管，第八管为空白对照。血浆、

3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应HbA1c含量即可。

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。从第七管中吸出500ul弃去。

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