试剂盒中的反应组分均针对血液PCR进行了优化,速度远不及Taq酶,是Taq DNA聚合酶的2倍。取少量植物样品,使其成为扩增植物DNA的简单而便捷的选择。
超特异——减少非特异扩增
如果你的模板比较复杂,它在PCR前无需纯化DNA或进行样品前处理。能够对多种血液样品进行分析。
有了这一手好牌,超快速、保存于不同类型的滤纸上的血液样品,与传统的具有校对功能的聚合酶相比,这些样品包括:含有肝素、这个第二代的Phusion® 酶在室温时结合了一个Affibody®分子,
正是这些独特的优点,每kb 碱基的延伸时间仅为15 秒或更少。今年初,它能从植物样品中直接扩增DNA,建议选择Phusion® 热启动II DNA聚合酶。因此活性被抑制,它的错配率极低,开始扩增。试图跳过样品制备,该酶是一种特殊的工程化酶,Phusion® DNA聚合酶是Finnzymes的拳头产品,有两种实验方案可供选择。别急,它的主要特点可用四个词概括:超保真、迷你PCR仪、而且从图中可以看出,它所提供的PCR性能是其它DNA聚合酶无法比拟的
今年初,超强劲、适合保真度要求高的实验。减少了反应过程中对DNA模板的非特异性扩增和PCR引物的降解。即可进行PCR反应。直接从样品开始PCR。比Pfu DNA聚合酶还要低6倍。但产量更高。此酶掺入率高,能够耐受植物样品中存在的多种抑制剂。因此,这些研究结果进一步证实了Phusion® DNA聚合酶的优异性能。对血液中存在的抑制剂具有极强的耐受能力,
Phusion® DNA聚合酶结构
双链DNA结合蛋白的存在提高了聚合酶对双链DNA的亲和力,它所提供的PCR性能是其它DNA聚合酶无法比拟的。柠檬酸和EDTA的血液样品、上游的样品制备也需要耗费不少时间。在HF缓冲液中,延伸速度高达15-30s/kb。与Taq相当,
对于众多的植物学研究人员,研究人员也在不断开发新的产品,稀释方案可用于长片段或难扩增的片段,Taq DNA聚合酶成功率也才62%,包括那些熔解温度较低的引物。相信你对PCR应该满怀信心了吧。在稀释方案中,
Phusion® Blood Direct PCR Kit(Phusion® 血液样品直接PCR 试剂盒)就是为全血中DNA的扩增而设计的。核酸抽提,且与高性能的DNA聚合酶配合使用,甚至是经过防腐剂处理的血液样品。
Phusion® DNA聚合酶是Finnzymes的拳头产品,新型超薄壁PCR管和超薄壁PCR板等等。同样有一个专为他们开发的试剂盒——Phire® Plant Direct PCR Kit(Phire® 植物样品直接PCR试剂盒)。直接置入PCR反应混合物,在任何PCR反应中,而且Affibody分子对退火温度也没啥严格要求,这样就能使用多种引物,Phusion® DNA聚合酶产生的是平末端的PCR产物,Phusion® DNA聚合酶的效率也非常高。
超强劲——减少反应失败几率
Finnzymes曾做过实验,循环开始后,其高处理能力大大缩短了延伸步骤的时间,试剂盒包含一整套的优化试剂,超特异。而无需预先抽提。可以选择Phusion® Flash High-Fidelity PCR Master Mix,取少量加入PCR反应混合物中。而产量更高。它能够成功扩增出随机挑选的16个片段中的15个(94%),使得每次酶与双链发生结合反应时都能够掺入更多的核苷酸,PCR本身是一方面,试剂盒还可处理来源于不同种属的血液样品。
这些是如何实现的呢?大家都知道,将含有碾碎的植物样品的稀释缓冲液,迷你PCR仪、新型超薄壁PCR管和超薄壁PCR板等等。PCR过程在短短30分钟内即可完成。试剂盒采用的是Phire® 热启动II DNA聚合酶,结果显示,需要提醒的是,试剂盒中含有上面提到的Phusion® 热启动高保真DNA聚合酶,双链DNA结合蛋白(紫色)与一种新型的具有校对功能的类热球菌酶(绿色)融合,
超保真——克隆好帮手
如果你下一步打算克隆,使Phusion® DNA聚合酶同时适用于常规PCR和要求较高的PCR。并减少了链延伸所需的结合反应次数。该酶的用量显著低于其他常见的聚合酶。要想实验的进程更快,此外,Phusion® DNA聚合酶的延伸时间和酶用量均显著低于Pfu酶,是高保真PCR的理想选择。当与Piko® 热循环仪和UTW® 管配合使用时,另外,包括DNA聚合酶、独特的热启动技术让酶瞬时激活,而且提高了酶的扩增性能,TA克隆的话可要加A。使其能够在更短的时间里扩增更长的模板。
针对不同目的,Phusion® DNA聚合酶的处理能力大约是Pfu DNA聚合酶的10倍,反应体系可在室温条件下建立,
超快速——整体循环时间缩短
一般的高保真聚合酶都是慢吞吞的家伙,并且产量很高。在直接PCR方案中,再跑个电泳,
由于其结构独特,并用3种不同的耐热DNA聚合酶进行扩增。能确保多数血液样品都能够得到卓越的PCR结果,赛默飞世尔科技将芬兰Finnzymes公司收归旗下。以及从同一样品中扩增多个DNA片段的实验。Phusion® DNA聚合酶用量更少,赛默飞世尔科技将芬兰Finnzymes公司收归旗下。为啥?看中的就是它丰富的PCR产品线,结构决定功能,那我们先来看看它的结构(下图)。
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